(Kao dobavljač od povjerenja, HANGZHOU JECI BIOCHEM nudi stabilnu-proizvodnju, visoko{1}}kvalitetu NAD (nikotinamid adenin dinukleotid, CAS 53‑84‑9), pružajući pouzdanu podršku sirovinama za IVD i primjene metaboličkih analiza. Naš dosljedan učinak i stroga kontrola kvalitete čine nas preferiranim partnerom za dijagnostičku-nabavku NAD-a.)
NAD (nikotinamid adenin dinukleotid) važan je koenzim prirodno prisutan u stanicama, a postoji u dva oblika: oksidirani oblik (NAD⁺) i reducirani oblik (NADH). Može se međusobno konvertirati kroz redoks reakcije, regulirajući različite biološke procese kao što je metabolizam stanične energije i prijenos signala. NAD sudjeluje u ključnim enzimskim reakcijama za hvatanje promjena metabolita, a abnormalnosti u razinama NAD i NADH i njihovim omjerima usko su povezane s pojavom i razvojem mnogih bolesti. Stoga je postao važan marker za kliničko biokemijsko testiranje i rano otkrivanje bolesti. NAD proizvodi visoke -čistoće i visoke{5}}stabilnosti dijagnostičkog-razreda, kao temeljne sirovine za in vitro dijagnostičke reagense (IVD) i setove za metaboličko testiranje, igraju ključnu ulogu u poboljšanju osjetljivosti detekcije i pouzdanosti rezultata.
Povijest razvoja dijagnostičkog-razreda NAD
Godine 1906. Arthur Harden otkrio je "misteriozni faktor koenzima" koji potiče metabolizam tijekom svog proučavanja alkoholne fermentacije kvasca (kasnije se pokazalo da je NAD).
Godine 1929. Hans von Euler-Chelpin identificirao je dinukleotidnu strukturu NAD-a.
Godine 1930. Otto Warburg razjasnio je redoks mehanizam između NAD i NADH, pojašnjavajući da NADH pokazuje karakterističnu ultraljubičastu apsorpciju na 340 nm dok NAD nema apsorpciju na ovoj valnoj duljini, postavljajući teoretski temelj za enzimske testove.
Godine 1948. Horecker i sur. potvrdio je molarni koeficijent ekstinkcije NADH na 340 nm, omogućujući izravnu kvantifikaciju brzina enzimske reakcije kroz promjene apsorbancije [1].
Godine 1961. Oliver H. Lowry uspostavio je NAD(P)/H cikličku metodu, pionirsku kvantitativnu analizu tkivno/staničnog NAD(P)/H.
Od 1962. do 1963., Boehringer Mannheim (kasnije kupljen od strane Rochea) lansirao je kit reagensa koji se temelji na NADH detekciji apsorbancije od 340 nm za laktat dehidrogenazu (LDH), postigavši prvu komercijalnu primjenu dijagnostičkog-razreda NAD kao koenzimske sirovine.
Godine 1973. Bernofsky i sur. uspostavio je princip ADH-PES-MTT sustava pojačanja (ADH-PES-MTT kolorimetrijskog sustava) [2];同年, Kato et al. (Lowry Laboratory) razvio je metodu dvojnog enzimskog ciklusa ADH-MDH-, koja omogućuje vrlo osjetljivu detekciju NAD/NADH [3].
Od tada je dijagnostički{0}}NAD postao temeljna sirovina za rutinska biokemijska testiranja i kontinuirano se širio na najmodernija-polja kao što su istraživanje biomarkera neurodegenerativnih bolesti, praćenje metabolizma tumora i procjena starenja.
Dijagnostički - stupanj NAD scenarija primjene
Osnovne sirovine za kliničku biokemijsku dijagnozu
① Detekcija laktat dehidrogenaze (LDH).
Princip detekcije:
Laktat+NAD+⟶LDHPiruvat+NADH+H+
Scenariji primjene: Zavod za kardiologiju (dijagnostika akutnog infarkta miokarda), Klinički laboratorij (dijagnostika hemolitičke anemije), Hepatologija (procjena oštećenja jetrenih stanica) itd.
Normalni raspon LDH: 140 - 280 U/L (odrasli, postoje razlike među metodama)
Klinički značaj: > 280 U/L (ukazuje na oštećenje tkiva (jetre, srca, bubrega, mišića, pluća, itd.)), > 500 U/L (često se viđa kod infarkta miokarda, hemolitičke anemije, malignih tumora, teških infekcija).
② Detekcija malat dehidrogenaze (MDH).
Princip detekcije:
Jabučna kiselina+NAD+⟶MDHoksaloctena kiselina+NADH+H+
Scenariji primjene: Klinički reagensi (dijagnostika mitohondrijske bolesti), Područje znanstvenog istraživanja (istraživanje mitohondrijske funkcije) itd.
Normalni raspon MDH: 12.5 - 50 U/L (različiti laboratoriji imaju male razlike zbog metoda detekcije i reagensa)
Klinički značaj: Povišenje ukazuje na oštećenje mitohondrija, nekrozu tkiva itd.
③ Detekcija izocitrat dehidrogenaze (ICDH).
Princip detekcije:
Izocitrična kiselina+NAD+⟶ICDH -ketoglutarna kiselina+NADH+H+
Scenariji primjene: Klinička dijagnoza mitohondrijske bolesti, Područje znanstvenog istraživanja (procjena oštećenja jetre, istraživanje energetskog metabolizma) itd.
Normalni raspon ICDH: 1 - 5 U/L (serum)
Klinički značaj: Povišenje ukazuje na oštećenje mitohondrija, oštećenje hepatocita, nekrozu tkiva itd.
④Detekcija kreatin kinaze (CK).
Princip detekcije:
Fosfokreatin+ADPGlukoza+ATPG-6-P+NAD+⟶CKKreatin+ATP⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Scenariji primjene: Odjel za kardiologiju (akutni infarkt miokarda, miokarditis), Ortopedija/Hitna služba (ozljeda mišića, rabdomioliza), Neurologija (miopatija) itd.
Normalni raspon CK: Muškarci 38 - 174 U/L; Žene 26 - 140 U/L (razlike među metodama)
Klinički značaj: Povišene razine ukazuju na ozljedu miokarda ili skeletnih mišića, što se često vidi kod infarkta miokarda, miokarditisa, rabdomiolize, napornog vježbanja itd.
⑤Detekcija glukoze
Princip detekcije:
Glukoza+ATPG-6-P+NAD+⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Scenariji primjene: Endokrinologija (dijagnostika dijabetesa i praćenje glukoze u krvi), Odjel hitne pomoći (hipoglikemijska koma, hiperglikemijska hitna dijagnoza), intenzivna medicina (praćenje glukoze u krvi pacijenata na intenzivnoj njezi), itd.
Normalni raspon glukoze: natašte 3.9 - 6.1 mmol/L; 2 sata nakon obroka < 7,8 mmol/L
Klinički značaj: povišene razine vidljive su kod dijabetesa, stresne hiperglikemije; Snižene razine vidljive su kod hipoglikemije, inzulinoma, teške bolesti jetre itd.
⑥Detekcija laktata
Princip detekcije:
Laktat+NAD+⟶LDHPiruvat+NADH+H+
Scenariji primjene: Odjel za hitnu medicinu (procjena šoka/hipoksije tkiva), Odjel za intenzivnu njegu (procjena spašavanja kritičnih pacijenata nakon -), Odjel za kardiologiju (zatajenje srca), Infektivne bolesti (sepsa), Sportska medicina (procjena fizičkog kapaciteta sportaša), itd.
Normalni raspon laktata: 0.5 - 2.2 mmol/L (venska krv)
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑦ Detekcija galaktoze
Princip detekcije:
-D-Galaktoza+NAD+⟶GalDHgalaktonska kiselina+NADH+H+
Scenariji primjene: Neonatalni probir (dijagnostika galaktozemije), pedijatrija (urođene pogreške metabolizma), gastroenterologija (identifikacija intolerancije na laktozu), hepatologija (procjena funkcije jetre), itd.
Normalni raspon galaktoze: Serum natašte: < 0,28 mmol/L; Novorođenčad: < 1,11 mmol/L
Klinički značaj: Povišene razine vidljive su kod galaktozemije, insuficijencije jetre, kongenitalnog nedostatka metaboličkog enzima galaktoze, itd.
⑧ Detekcija etanola
Princip detekcije:
Etanol+NAD+⟶ADHAcetaldehid+NADH+H+
Scenariji primjene: Hitna služba (dijagnostika akutnog trovanja alkoholom), centar za tjelesni pregled (alkotestiranje vozača), forenzička identifikacija (mjerenje koncentracije alkohola u krvi) itd.
Normalni raspon etanola: 0 mmol/L (ne-pije)
Klinički značaj: Povišene razine ukazuju na konzumaciju alkohola ili trovanje alkoholom; pretjerano visoke koncentracije mogu dovesti do depresije središnjeg živčanog sustava, inhibicije disanja i cirkulacije.
⑨ -Detekcija hidroksibutirata
Princip detekcije:
-Hidroksimaslačna kiselina+NAD+⟶ -HBDHAcetooctena kiselina+NADH+H+
Scenariji primjene: Endokrinologija (dijagnostika dijabetičke ketoacidoze), Nutricionizam (Praćenje unosa hranom) itd.
Normalni raspon -hidroksibutirata: Krv natašte: < 0,27 mmol/L (Razlike među metodama)
Klinički značaj: Povišene razine ukazuju na dijabetičku ketoacidozu, gladovanje, dugotrajno -gladovanje, alkoholnu ketoacidozu itd.
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑨ -Detekcija hidroksimaslačne kiseline
Princip detekcije:
-Hidroksimaslačna kiselina+NAD+⟶ -HBDHAcetooctena kiselina+NADH+H+
Scenariji primjene: Endokrinologija (dijagnostika dijabetičke ketoacidoze), Nutricionizam (Praćenje prehrane) itd.
Normalni raspon -hidroksimaslačne kiseline: Krv natašte: < 0,27 mmol/L (Razlike među metodama)
Klinički značaj: Povišene razine ukazuju na dijabetičku ketoacidozu, gladovanje, dugotrajno -gladovanje, alkoholnu ketozu itd.
Biomarkeri za procjenu bolesti
NAD, kao biomarker za procjenu bolesti, trenutno je u fazi kliničkog prevođenja. Godine 2022. NADMED-ov Q-NADMED komplet za otkrivanje NAD⁺/NADH u krvi postao je prvi svjetski proizvod za otkrivanje NAD-a koji je dobio CE-IVD certifikat (Direktiva za in vitro dijagnostičke medicinske uređaje). On otkriva koncentracije NAD⁺ i NADH u ljudskoj punoj krvi, s granicama detekcije NAD⁺: 330 nM; NADH: 119 nM. Koncentracija NAD⁺ u punoj krvi zdravih odraslih osoba je približno 18 μM (raspon: 15-23 μM) [4], koristi se za kvantitativnu detekciju pune krvi i praćenje terapijskih učinaka NAD prekursora. Međutim, još nije odobren kao neovisni dijagnostički kriterij bolesti.
U području znanstvenih istraživanja, potencijalna vrijednost omjera NAD/NADH u cerebrospinalnoj tekućini ili krvi u neurodegenerativnim bolestima (npr. Alzheimerova bolest, Parkinsonova bolest), metabolizmu tumora i procjeni starenja se duboko proučava [5-8], ali trenutno se uglavnom primjenjuje u kliničkim ispitivanjima i znanstvenim istraživanjima, a ne u rutinskoj kliničkoj dijagnozi.
>Tržišni krajolik dijagnostičkog-razreda NAD<
Trenutačno je globalno dijagnostičko-tržište NAD-a u fazi brzog razvoja potaknutog tehnologijom i rastom potražnje. Industrija brzo prelazi s uvozne-dominacije na domaću zamjenu. Područje in vitro dijagnostike pokazuje strukturnu diferencijaciju: iako se ukupan broj kompleta reagensa smanjio, vodeća poduzeća (npr. Roche Diagnostics, Mindray Medical) ostaju stabilna i šire se na nove projekte kao što su metaboličko testiranje i procjena starenja, dok mala i srednja-poduzeća smanjuju proizvodne linije zbog pritiska na profit.
Glavni dobavljači dijagnostičke{0}}klase NAD uključuju: Roche, Oriental Yeast, SunClone Bio, Shenzhen Bangtai itd.
Reference
[1] HORECKER BL, KORNBERG A. Koeficijenti ekstinkcije reducirane trake piridinskih nukleotida [J]. J Biol Chem, 1948, 175(1): 385 - 90.
[2] BENFORSKY C, SWAN M. Poboljšani ciklički test za nikotinamid adenin dinukleotid [J]. Anal Biochem, 1973, 53(2): 452 - 8.
[3] KATO T, BERNTSEN O, CARTER S, et al. Metoda enzimskog ciklusa za nikotinamid - adenin dinukleotid s jabučnom i alkoholnom dehidrogenazom [J]. Anal Biochem, 1973, 56(2): 392 - 8.
[4] NATALIA V Balshova, Lev G Zavileysky, Artem V Artukhov, et al. Učinkovita analiza i značaj markera NAD⁺ u ljudskoj krvi [J]. Front Med, 2022, 9, 886645.
[5] LAN Z P. Novi sustav za otkrivanje biomarkera i njegova primjena u Kini [Patent]. Kina, 119560018A[P]. 2024 - 11 - 12.
[6] YAN L, SUN MR, WU J, et al. Vrsta fluorescentne sonde za detekciju pirimidinskih nukleozida i metoda njezine pripreme i primjena: Kina, 117887460A[P]. 2025 - 09 - 02.
[7] JIN LP, ZHAO X, LU Y, et al. Kromogeno određivanje nikotinamid adenin dinukleotida i njegovih metabolita korištenjem piridin nukleozida kao kofaktora i njegova primjena u dijagnostici ili liječenju fermentacijskih tekućina [J]. Kina, 112694070A[P]. 2023 - 12 - 22.
[8] HONG J, HAN ZW, NING XQ, et al. Primjena NAD⁺ kao molekularnog markera za prilagođeni razvoj proizvoda za dijagnosticiranje tegoba ženskih spolnih organa [J]. Kina, 118109777A[P]. 2024 - 05 - 10.
